Măsurați creșterea bacteriilor

Există multe modalități de a măsura creșterea bacteriilor, iar unele sunt mai complicate decât altele. Deși veți pierde un acord cu privire la măsurătorile dvs., cele mai simple metode sunt suficient de precise și sunt utilizate pe scară largă. Cele mai cunoscute metode sunt observarea și numărarea bacteriilor, măsurarea materiei umede și uscate și măsurarea turbidității. Laboratorul școlii dvs. ar trebui să aibă echipamentul și accesoriile pentru a finaliza cel puțin unul dintre aceste experimente.

metodă

Metoda 1
Observați direct bacteriile

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 1
1
Obțineți materialul. Există câteva instrumente speciale pe care ar trebui să le aveți, în plus față de ceea ce găsiți în majoritatea laboratoarelor de biologie. Obținerea instrumentelor și a containerelor în avans vă permite să faceți acest experiment fără a fi nevoie să vă întoarceți la dulap. Este important să știm de la început pentru ce este folosit instrumentul. De asemenea, ar trebui să cunoașteți câțiva termeni de bază.
  • Obțineți o cameră de numărare. Aceste instrumente au o cameră încorporată, un microscop și un microscop, astfel încât acestea să fie ușor de configurat și de utilizat. Le puteți cumpăra de la companii care furnizează laboratoare și clase de școli. Acestea vin cu instrucțiuni care vă ghidează prin proces.
  • Ia o placă turnată sau o plăcuță. Acestea sunt navele în care veți observa bacteriile.
  • Termenul de cultură se referă la un organism care a fost produs artificial pentru un experiment.
  • Mediul LB este un mediu lichid în care cultura crește.
  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 2
    2
    Utilizați placa turnată sau frotiu. De asemenea, puteți localiza bacteriile direct pe un diapozitiv de microscop pentru a le privi sub microscop. Se pune cultura pe placă și se pune sub microscop. Observați câte celule bacteriene sunt în el.
  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 3
    3
    Asigurați-vă că aveți concentrația potrivită. Dacă există prea multe bacterii, ele se vor afla una peste alta și nu veți putea conta în mod corect. Se diluează cultura prin amestecarea cu mai multe medii LB. Dacă sunt prea puține, atunci nu aveți suficient pentru un număr precis. Filtrați mediul LB cu o unitate de filtrare.
  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 4
    4
    Numără bacteriile. Ultimul pas este de a le număra. Uită-te prin lupă în camera de numărare și notează câți văd. Comparați acest număr cu alte teste.
  • Metoda 2
    Măsurați masa umedă și uscată

    Imaginea intitulă Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 5
    1
    Asigurați-vă că aveți accesoriile potrivite. Aceasta implică utilizarea de echipamente costisitoare și consumă mult timp. Dacă laboratorul dumneavoastră nu este echipat cu echipamentul potrivit, trebuie să luați în considerare utilizarea unei metode diferite. Dacă puteți, măsurarea masei umede și uscate vă oferă citiri mai consecvente. Aveți nevoie de:
    • Cuptor cu convecție hidraulică
    • Traversă de aluminiu
    • Unele pistoane
    • Centrifugă sau sistem de filtrare în laborator
  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 6
    2
    Asigurați-vă că cultura este într-un balon. Dacă nu, atunci se toarnă într-una. Ar trebui să fie în mediul LB în acest moment, deși va fi separat mai târziu.
  • Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 7
    3
    Uscați o tavă de aluminiu în cuptorul de laborator. O alternativă la aceasta este o membrană filtrantă din acetat de celuloză, diametru 47 mm, mărimea porilor de 0,45 pm. Indiferent ce folosiți, ar trebui să o cântăriți acum, astfel încât să știți cât mai târziu trebuie să scăpați din măsurarea dvs. dacă aveți celule bacteriene pe ea.
  • Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 8
    4
    Agitați balonul în care faceți cultura, astfel încât să fie uniform amestecat. Celulele se scufundă natural datorită gravității. Se amestecă puțin, astfel încât să se răspândească uniform în balon. Acest lucru vă va oferi un eșantion mai reprezentativ.


  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 9
    5
    Se separă celulele bacteriene cu o centrifugă din mediul LB. Acest dispozitiv rotește un piston și o contragreutate la viteză mare, care scurge mediul LB și menține cultura. Consultați instrucțiunile pentru o descriere mai detaliată a acestui proces.
  • Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 10
    6
    Răsturnați terciul și puneți-l pe o tavă de cântărire. Scoateți mediul PB. Nu mai aveți nevoie de ea, dar pistonul deja, așa că păstrați-l.
  • Image cu titlul Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 11
    7
    Clătiți centrifuga și turnați apa de clătire în tigaie. Se adaugă balonul la celulele bacteriene cu apă de clătire. Deci, aveți o greutate umedă.
  • Imaginea intitulă Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 12
    8
    Găsiți greutatea uscată. Pentru a măsura greutatea uscată, puneți tigaia în cuptor și uscați la 100 ° C timp de 6 până la 24 de ore, urmând instrucțiunile pentru acest cuptor și / sau tava. Asigurați-vă că nu depășiți această temperatură, astfel încât bacteriile să nu se ardă. Se cântăresc bacteriile după acest timp și nu uitați să scoateți greutatea talerului.
  • Metoda 3
    Măsurați turbiditatea

    Imaginea cu titlul Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 13
    1
    Obțineți echipamentul necesar. Veți avea nevoie de o sursă de lumină și un spectrofotometru. Le duci într-un magazin pentru echipamente de laborator. Spectrofotometrul va fi însoțit de instrucțiuni pentru utilizarea corectă a modelului achiziționat. Acest echipament este ieftin și ușor de utilizat, deci aceasta este una dintre metodele cele mai frecvent utilizate pentru a măsura creșterea bacteriilor.
  • Imaginea intitulă Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 14
    2
    Lumină cu lumina prin eșantion. Pentru a arăta în mod clar laicilor, cloudiness înseamnă cât de neclar este eșantionul. Trebuie să obțineți o măsură de turbiditate, care este măsurată în NTU (valoarea turbidității nephelometrice). Echipamentul dvs. poate necesita calibrare înainte de a putea măsura cu exactitate turbiditatea probei.
  • Imaginea intitulă Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 15
    3
    Luați note. Turbiditatea este cantitatea de bacterii din eșantion. Spectrofotometrul vă va indica permeabilitatea procentuală (% T). Acest număr este mai mare atunci când turbiditatea este mai mică. Comparați numerele de la diferite teste pentru a măsura creșterea bacteriilor.
  • avertismente

    • Deoarece aveți de-a face cu colonii bacteriene, trebuie să luați măsurile de precauție necesare, cum ar fi purtarea ochelarilor și a mănușilor. Puteți purta, de asemenea, o mască de praf, mai ales dacă nu sunteți sigur ce fel de bacterii reproduceți.
    • Luați măsuri de precauție cu orice fel de bacterii, chiar dacă le considerați inofensive, asigurându-vă că toate rănile, tăieturile și zgârieturile sunt complet acoperite înainte de a începe.

    Ce ai nevoie

    • PB mediu, apă de la robinet, apă de la piscină sau apă din iaz
    • Mediu steril, cum ar fi agar
    • cutii Petri
    • Pipete sterile
    • Microscop (opțional)
    • cameră de numărare
    • mănuși de latex
    • ochelari de protecție
    • cuptor hidraulic
    Distribuiți pe rețelele sociale:

    înrudit